SARS CoV-2 ELISpot : un nouveau test dans l’arsenal diagnostique et vaccinal contre la COVID 19

Suite à l’infection par le SARS-CoV-2, une réponse immunitaire innée apparait rapidement au site de l’infection puis une réponse adaptative se produit dans les 6 à 10 jours. Cette réponse se divise en 2 types : l’immunité cellulaire et l’immunité humorale avec le recrutement et la multiplication de cellules spécifiques du virus.

La première est principalement médiée par les lymphocytes T effecteurs (lymphocytes T helper CD4+ et lymphocytes T cytotoxiques CD8+) tandis que la seconde est majoritairement médiée par les lymphocytes B producteurs d’anticorps. L’action conjointe de ces cellules spécifiques permet l’élimination ciblée des cellules infectées dans l’organisme et du virus circulant(1).

La réponse en anticorps n'est cependant pas toujours présente (figure1). De plus, le taux d'anticorps peut diminuer de manière significative après l'infection. Dans ce contexte, l'exploration de l'immunité liée aux lymphocytes T présente un intérêt. Ces lymphocytes T peuvent être détectés dans le sang de 2 à 4 jours après l'apparition des symptômes et perdurer 6 à 9 mois minimum.

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Chez quels profils de patients faut-il étudier cette réponse immunitaire T ?

La sérologie est, à ce jour, le principal outil permettant d’explorer la réponse immunitaire vis-à-vis du SARS-CoV-2. Sa place dans l’arsenal diagnostique et vaccinal a été reprécisée avec les recommandations de la Haute Autorité de Santé (HAS) du 17 juin 2021(2).

Néanmoins, l’étude de la réponse immunitaire médiée par les lymphocytes T CD4+ et CD8+ présente un intérêt :

  • Dans le diagnostic rétrospectif d’une infection par le SARS-CoV-2 non objectivée par la réalisation d’une RT-PCR en aigu chez les patients présentant une sérologie négative ou douteuse. Cette situation est observée principalement chez les patients ayant développé une forme pauci ou asymptomatique de l’infection(3) .
    Chez ces patients infectés séronégatifs, la sensibilité de l’ELISpot est de 50% à 80%(4,5).
  • Dans le diagnostic différentiel de l’infection par le SARS-CoV-2 chez les patients immunodéprimés(6),
  • Dans le suivi de l’efficacité vaccinale(7) notamment chez les patients immunodéprimés,
  • Et dans l’étude de l’efficacité vaccinale contre les variants du SARS-CoV-2 (8).

Qu'est qu'un ELISpot ?

Le test consiste à mesurer la réponse cellulaire spécifique vis-à-vis de plus de 250 peptides des protéines Spike (S) et de Nucléocapside (N) du SARS-CoV-2 en quantifiant le nombre de lymphocytes T produisant de l’interféron γ.

Les lymphocytes du malade ou du patient vacciné sont isolés puis mis en contact avec les antigènes du virus(9).

Après 20 heures d’incubation, on mesure la production d’interféron γ.

Un test positif permet de différencier l’immunité liée à l’infection par le virus (positivité anti-S et anti-N) d’une immunité liée à la vaccination (positivité anti-S seule).

Structure schématisée de Sars COV2

En pratique

  • Deux tubes de 5 mL de sang total sur héparinate de lithium sans gel sont requis.
  • Inverser les tubes 8 à 10 fois.
  • Les conserver à temperature ambiante 
  • Les remettre au coursier le jour du prélèvement.
  • Les tubes de sang total héparinés doivent parvenir à temperature ambiante en technique maximum 32 heures après le prélèvement.
  • Indiquer l'heure de prélèvement sur la FDE.
  • Jours de prélèvement: lundi, mardi, mercredi, jeudi exclusivement. 
  • Ne pas prélever la veille d'un jour férié.
  • Délai de rendu : J +1
  • Prix fixe : 200 € (Hors Nomenclature)

Bibliographie 
 

  1. Sette A, Crotty S. Adaptive immunity to SARS-CoV-2 and COVID-19. Cell. Published online January 2021:S0092867421000076. doi:10.1016/j.cell.2021.01.007.
  2. https://www.has-sante.fr/jcms/p_3272802/fr/avis-n-2021-0042/ac/seap-du-17-juin-2021-du-college-de-la-has-relatif-aux-modifications-des-conditions-d-inscription-sur-la-lap-mentionnee-a-l-article-l-162-1-7-du-css-de-la-detection-des-anticorps-seriques-diriges-contre-le-coronavirus-sars-cov-2.
  3. Sekine T, Perez-Potti A, Rivera-Ballesteros O et al. Robust T cell immunity in convalescent individuals with asymptomatic or mild COVID-19. Cell. 2020; 183(1): 158-168 
  4. Schwarzkopf S, Krawczyk A, Knop D et al. Cellular Immunity in COVID-19 Convalescents with PCR-Confirmed Infection but with Undetectable SARS-CoV-2-Specific IgG. Emerg Infect Dis. 2021 Jan;27(1). doi: 10.3201/2701.203772. Epub 2020 Oct 15.
  5. ELISpot COVID to explore the cellular  immune response to SARS-CoV-2. Trombert-Paolantoni S., Baer M.E, Litou N., Roquebert B., Lecorche E., Verdurme L., Haim-Boukobza S. poster 0506 ECCMID 2021.
  6. Candon S, Guerrot D, Drouot L et al. T cell and antibody response to SARS-CoV-2 : experience from a French transplantation and hemodialysys center during the COVID-19 pandemic. Am J Transplant. 2021 Feb;21(2):854-863.
  7. Angyal A, Longet S et al.  T-Cell and Antibody Responses to First BNT162b2 Vaccine Dose in Previously SARS-CoV-2-Infected and Infection-Naive UK Healthcare. The Lancet preprint.
  8. Tarke A, Sidney J, Methot N et al. Negligible impact of SARS-CoV-2 variants on CD4 + and CD8 + T cell reactivity in COVID-19 exposed donors and vaccinees. bioRxiv. 2021 March
  9. Aspects immunologiques et virologiques de l’infection par le SARS-CoV-2. HAS 25 avis du novembre 2020.

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